产品说明
kod dna polymerase是基于超嗜热原始菌thermococcus kodakaraensis kod1的dna聚合酶,在大肠杆菌中重组表达得到的高度热稳定的dna聚合酶,具有较高的扩增效率和保真性。由于其具备超强的3' - 5' 核酸外切酶活性,外切酶活性使其具有比taq dna polymerase更高的保真性,并且还有着高效的扩增效率,可以到达1kb/10s的速度,同时具有很强的长片扩增能力。 kod dna polymerase扩增反应产生平末端产物。
产品特点
具有强力的3→5核酸外切酶活性(校正活性),可准确地对目的片段进行扩增;
kod酶的保真性是taq酶的约50倍;
可扩增结构复杂的dna模板;
产品应用
pcr克隆(平末端克隆),突变修复,测序反应,复杂模板扩增
产品组分
产品参数
操作说明
【注】:a.引物浓度:一般来说反应体系中引物终浓度为0.2um即可得到较好的效果。反应性能较差时,可在终浓度0.1um-1.0um范围内调整引物浓度。
b.模板浓度:动植物基因组dna 0.1~1ug,大肠杆菌基因组dna 10~100 ng,λdna 0.1~10 ng,质粒dna 0.1~10 ng。如模板为未稀释cdna原液,使用体积不应超过qpcr反应总体积的1/10。
c.聚合酶浓度:酶量可在0.25 - 1ul之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。
d.mg2 和添加剂:大部分pcr反应体系中的mg2 浓度应在1.0–5.0 mm范围之内,但对于一些扩增困难的样本,例如高gc的dna样本,可能需要在pcr反应体系中加入添加剂,例如dmso或甲酰胺等。
【注】:e.退火温度和时间:退火温度需要根据引物的tm值进行调整,一般设置成低于引物tm值3 ~ 5℃即可。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。