产品说明
rtx reverse transcriptase是经过基因工程改造的全新逆转录酶。rtx具有更高的热稳定性和更高的盐耐受能力,可用于具有二级结构的rna 模板的逆转录。逆转录温度在60-70°c具有更优的活性,可完成 cdna 合成或者直接进行一步法 rt-pcr。95℃3分钟热失活。
产品介绍
rtx反转录酶是通过大肠杆菌表达获得的反转录酶。该酶具有高温度耐受性,适用于高温反转录,具有更高的稳定性和反转录合成能力。可应用于要求在室温下建立的 rt 反应;适用于扩增反应中 rna 的检测,特别适用于 lamp实验。
产品特点
高的热稳定性, 逆转录温度在60-70°c具有更优的活性;
更高的盐耐受能力;
具有二级结构的rna 模板的逆转录;
95℃3分钟热失活。
产品应用
rt-pcr、rt-lamp、 cdna 合成
产品组分
产品参数
操作说明
cdna合成
按下表添加并混合各组分,60°c孵育0.5h。然后95°c加热3 min使酶失活,逆转录产物储存在-20°c。
注:1 ng-1 µg 总rna模板或50 pg-100 ng poly(a)-rna。在95℃ 3min使酶失活。对于下游pcr应用,逆转录产物的加入体积不应超过pcr反应总体积的1/10。
一步法rt-pcr反应
一般情况下一个反应推荐rtx reverse transcriptase浓度为20-30u/30μl之间,扩增条件如下:
注:退火温度需要根据引物的tm值进行调整,一般设置成低于引物tm值3 ~ 5℃即可。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。