产品说明
m-mlv reverse transcriptase是经基因工程改造的反转录酶，降低了rnase h活性，提高了热稳定性，可以比野生型的m-mlv在更高的温度下合成第一链cdna。本产品在50-60°c均有正常活性，具有更高的特异性、更高的产量且可以合成长达12 kb的cdna。
产品介绍
mmlv逆转录酶是由moloney鼠白血病病毒来源的m-mlv基因经突变筛选，并通过大肠杆菌表达获得的反转录酶。该酶具有更高的温度耐受性，适用于高温反转录，有利于消除rna高级结构与非特异性因素对cdna合成的不利影响，具有更高的稳定性和反转录合成能力。
产品特点
耐高温：可在50-60℃高温条件下进行逆转录，并且反应保持稳定；
反转录效率高：针对低浓度rna模板，保证合成效率和成功率；
产品应用
第一链 cdna 合成，用于 rt-pcr 和rt-qpcr
合成 cdna，用于克隆和表达研究
产品数据
1、与同类产品sds-page电泳检测对比
line 1、2、3：csb-dem025 m-mlv逆转录酶
line 4：某品牌m-mlv 逆转录酶
图1. csb-dem025 m-mlv逆转录酶与同类产品sds-page电泳检测
2、与竞品酶对比测试
图2. csb-dem025 m-mlv reverse transcriptase与同类产品的逆转录温度测试
3、加速热稳定性
图3. csb-dem025 m-mlv reverse transcriptase 37℃加速热稳定性
产品组分
产品参数
操作说明
第一链cdna合成 (简易流程)
按下表添加并混合各组分，55°c孵育0.5h。如果使用随机引物，建议在55°c反应前先将反应体系置于25°c反应5 min。
注：1 ng-1 µg 总rna模板或50 pg-100 ng poly(a)-rna。在95℃ 3min使酶失活。对于下游pcr应用，逆转录产物的加入体积不应超过pcr反应总体积的1/10。
第一链cdna合成 (标准流程)
如果需要变性模板rna，请使用以下方案。
在无rnase的pcr管中加入rna模板和d(t)23vn引物。
*注：1 ng-1 µg 总rna模板或50 pg-100 ng poly(a)-rna。
将以上体系置于65°c下反应5min，使rna模板/引物变性后短暂离心并迅速置于冰上2min。
然后向上述pcr管中加入以下组分：
混匀后，55°c孵育0.5h。如果使用随机引物，建议在55°c反应前先将反应体系置于25°c反应5 min。
95°c加热3 min使酶失活，逆转录产物储存在-20°c。对于下游pcr应用，逆转录产物的加入体积不应超过pcr反应总体积的1/10。
一步法rt-qpcr反应
推荐使用本公司优化的one step rt-qpcr kit进行测试。一般情况下一个反应推荐m-mlv reverse transcriptase浓度为0.5-2u/μl，扩增条件如下：
