lncrna生物素探针制备实验方法-凯发k8网页登录

    lncrna是长链非编码rna，具有重要的调控功能。生物素探针制备是用于检测lncrna的常用实验方法。以下是lncrna生物素探针制备的实验方法：

材料：

    化学合成lncrna序列

    生物素标记试剂

    生物素-streptavidin结合酶

    purification streptavidin magnetic beads

    tris-buffered saline (tbs) buffer

    isopropanol

    rnase-free water

    100% ethanol

    真空泵

    离心管

    磁珠分离架

    热冷循环仪

    碱性磷酸缓冲液（pbs）

步骤：

    合成lncrna序列：根据目标lncrna的序列设计并合成相应的lncrna序列。
    生物素标记：将合成的lncrna序列和生物素标记试剂进行反应，标记lncrna序列上生物素基团。

    纯化标记的lncrna：将反应产物通过purification streptavidin magnetic beads进行纯化，将标记的lncrna分离和纯化出来。

    脱生物素标记的lncrna：通过在酸性条件下和生物素- streptavidin结合酶的作用，将lncrna与生物素结合的连接打断，获得脱生物素标记的lncrna。

    纯化脱生物素标记的lncrna：通过磁珠分离架和真空泵的作用，将脱生物素标记的lncrna从反应混合物中进行纯化。

    水解lncrna：通过加入rnase-free water和碱性磷酸缓冲液，将lncrna水解为大分子rna。

    纯化lncrna探针：通过加入等体积的异丙醇和100% 乙醇，然后通过离心的方式将最终的lncrna探针从反应混合物中进行纯化。

    最终产物检测：使用热冷循环仪等设备进行pcr扩增，验证生物素探针制备的效果。

以上就是lncrna生物素探针制备的实验方法。