无外泌体血清制备方法-凯发k8网页登录

信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-11-27 16:32:57

    以下是一种常用的无外泌体血清(exosome-depleted serum)制备方法:

1、材料

   血液样本

   离心管

   离心机

   无菌滤膜(0.22 μm孔径)

2、步骤

   准备血液样本:使用抗凝剂(如edta或肝素)采集血液样本,并将其转移到离心管中。

   预处理血液样本:将血液样本在室温下保持静置约30分钟,使血液凝固。然后,使用离心机以2000 g离心10分钟,将红细胞和凝块沉淀。

   收集上清液:使用无菌技术将上清液转移到新的离心管中,并避免沉淀物的转移。

   离心去除大颗粒物质:将上清液以2000 g离心10分钟,以去除细胞碎片和大颗粒物质。收集上清液转移到新的离心管中。

   无菌过滤:使用0.22 μm无菌滤膜过滤上清液,以去除残留的细胞碎片和微粒。将过滤后的上清液转移到新的离心管中。

   再次离心去除外泌体:使用离心机以最高速度(通常为10,000-20,000 g)离心30分钟,以沉淀残留的外泌体。收集上清液转移到新的离心管中。

   灭菌处理(可选):如果需要无菌血清,可以通过0.22 μm无菌滤膜再次过滤上清液。

   分装和储存:将制备好的无外泌体血清分装到适当的容器中,并在-80°c或液氮中储存。

   这个方法能够去除大多数的外泌体颗粒,但并不保证完全去除所有外泌体。因此,在一些研究中,可能需要进一步采用其他策略或技术来彻底去除外泌体。




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