双荧光素酶实验先加ren后加luc-凯发k8网页登录
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-10-27 17:02:39
双荧光素酶实验用于检测基因转录水平的变化。在该实验中,通常使用基因操纵技术将荧光素酶(luciferase)和重组酯酶(renilla luciferase)基因插入到感兴趣的基因启动子区域中,然后通过检测这两种荧光素酶的活性来确定基因的转录水平。
在实验中,先加入重组酯酶底物,如coelenterazine,使其与重组酯酶发生反应,产生荧光信号。然后再加入荧光素酶底物,如luciferin,使其与荧光素酶发生反应,产生另一种荧光信号。通过检测这两种荧光素酶的信号强度比值,可以确定基因的转录水平。
一般情况下,实验中先加入重组酯酶底物,再加入荧光素酶底物,这是因为重组酯酶的半衰期较短,需要尽快进行检测,而荧光素酶的半衰期较长,可以等待重组酯酶检测完毕后再加入。
因此,在双荧光素酶实验中,先加入ren后加luc是一种常用的操作顺序。但需要注意的是,具体实验操作顺序还需根据实验设计和样品特点进行优化和调整。
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