双特异性纳米抗体制备技术路线-凯发k8网页登录

信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-10-12 17:17:40

    双特异性纳米抗体是一种具有两个独立的结合位点,可以同时结合两个不同的抗原的抗体。以下是一种常见的双特异性纳米抗体制备技术路线:

    靶抗体筛选:首先,根据需要结合的两个抗原,分别制备单克隆抗体a和b。这些单克隆抗体可以通过免疫动物、混合细胞瘤技术等方法获得。

    抗体重组:将单克隆抗体a和b的抗体基因分别进行测序,并根据测序结果设计引物,扩增出对应的重链和轻链基因片段。然后,使用基因重组技术将这些基因片段与适当的连接片段相连,构建出双特异性纳米抗体的基因。

    抗体表达和纯化:将双特异性纳米抗体的基因导入至适合的宿主细胞中,如cho(chinese hamster ovary)细胞或hek293细胞,并利用适当的启动子和表达载体促使基因的表达。随后,使用适当的纯化方法(如亲和层析、离子交换层析等)从细胞培养液中纯化目标抗体。

    功能验证:对于制备出的双特异性纳米抗体,需要进行功能验证,确保其能够同时结合两个不同的抗原。这可以通过酶联免疫吸附试验(elisa)、免疫组化分析、流式细胞术等方法来进行。

    双特异性纳米抗体的制备是一项复杂而精细的工艺,可能需要多轮优化和筛选才能获得满意的结果。因此,在进行该技术路线时,经验丰富的科研人员和专家的指导非常重要。




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