技术专题
第②课开讲啦| 看直播，找答案，打通蛋白研究任督二脉！
文章来源：genecreate
作者：genecreate
发布时间：2020-05-11 09:57
01、讲座时间
2020年5月13日19:30-20:30
02、讲座主题
蛋白质组学和单抗技术在农学课题中的综合运用策略
03、讲师简介
詹雷雷
浙江大学生命科学学院博士、博士后
研究成果接连刊登在nature structural & molecular biology、rna biology、nature communications heredity、genome、 trends evolutionary biology等杂志 上；研究期间获得国家自然科学基金青年项目一项,国家博士后基金两项，浙江省博士后择优资助项目一项。
目前担任我司研发部学术pi ,主责多个科研合作项目,已协助客户发表论文数十篇，另有多篇文章在审稿和修回中。
04、报名方式
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答疑时间
学生疑问：胶体金稳定性一直不太好，放一段时间灵敏度就会降低或者升高，怎么调整？
讲师解答：如果原料各方面没有问题的前提下，结果不稳定，比较常见的原因有这两个：样本前理不当；成品未放置在干燥的环境下保存。
学生疑问：呼吸道病原微生物胶体金检测的假阴性如何避免或者降低？
讲师解答：一般情况下，假阴性主要是原料灵敏度不够导致，所以在开发成品之前，除了确保抗体的特异性外，还应大致了解自己的样本待检测范围。
学生疑问：蛋白表达在包涵体和上清对抗体制备的影响
讲师解答：抗原在是否能制备高亲和力抗体的过程中占据非常重要的位置，俗话说，抗原制备好了，抗体也就成功了一半，那么什么才叫好的抗原，最简单的理解，即蛋白结构及修饰越接近天然蛋白，蛋白质量就越好，所以大多数客户都更倾向于制备的免疫原能是上清表达的蛋白，但是做过大肠系统表达的都知道，只有30%-40%左右的蛋白能实现上清表达，所以这个时候抗体的筛选方案就非常重要了，当然如果制备的抗体只是做wb等基础的科研实验，包涵体也是可以用的，毕竟它的一级结构是没有问题的。
学生疑问：选择蛋白的全长或哪个区段制备抗体，最靠谱的依据是什么呢？
讲师解答：对于抗原的区间选择，没有金标准，不然也就不会有那么多失败的抗体案例了，通常情况下，对蛋白的全长进行一系列分析，比如抗原指数得分，比如亲疏水性，再比如保守区等一系列结构域分析，以及表达情况预测等等，然后再结合后期对抗体的应用需求，预算等等因素，综合选择合适的表达区间，合适的表达系统。
