无细胞蛋白合成技术原理-凯发k8网页登录
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-08-28 16:45:33
无细胞蛋白合成技术(cell-free protein synthesis,cfps)是一种在体外无需使用完整细胞的方法合成蛋白质。这种技术利用细胞质提取物中的细胞机器来实现蛋白质的合成过程。
无细胞蛋白合成技术的原理如下:
细胞质提取:从细菌、真核生物或其他生物的细胞中提取细胞质。一般情况下,细胞质提取液还会包含能提供能量、氨基酸和其他辅助物质的添加剂。
模板dna准备:将所需的目标蛋白质的基因序列转录成相应的转录模板dna。这可以通过化学合成、pcr扩增或从天然来源提取获得。
反应混合:将细胞质提取物、适当的能量源(如atp)、氨基酸、转录模板dna和其他必要的辅助物质混合在一起。此混合物中会存在有促进转录和翻译过程的酶、核酸和其他必要组分。
转录:通过加入适当的rna聚合酶和核苷酸三磷酸(ntps),转录模板dna会被转录成相应的mrna。这一过程可以在反应混合物中进行。
翻译:通过加入适当的细胞质提取物中的核糖体、氨基酰trna和其他必要的翻译辅助物质,mrna会被翻译为蛋白质。这一过程也可以在反应混合物中进行。
蛋白质产物收集:经过一段时间的反应,产生的蛋白质会积累在反应混合物中。可以通过不同的方法,如离心、亲和纯化等将蛋白质从混合物中分离和纯化出来。
无细胞蛋白合成技术具有许多优点,包括快速、灵活、高产量和可定制性强等。它在生物学研究、药物开发、蛋白质工程等领域中得到广泛应用。
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