人鼠嵌合型单克隆抗体的制备-凯发k8网页登录

    人鼠嵌合型单克隆抗体是一种通过将小鼠源的单克隆抗体的变异区域（complementarity-determining regions, cdrs）移植到人源抗体框架中，以增加其在人体内的稳定性和降低免疫原性的抗体。以下是一般的人鼠嵌合型单克隆抗体制备的步骤：

    靶抗原免疫：使用小鼠作为宿主动物，将目标抗原注射到小鼠体内，刺激其免疫系统产生特异性的抗体。

    单克隆抗体筛选：从免疫小鼠中获得脾脏或骨髓等组织，提取抗体产生的b细胞。然后，将这些b细胞与患者的骨髓细胞融合，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞会选择性地分泌只含有单一抗体种类的单克隆抗体。

    抗体基因克隆：从杂交瘤细胞中提取rna，并将其转录成cdna。然后，通过pcr扩增和克隆等技术，得到编码抗体的变异区域（cdrs）的dna序列。

    人鼠嵌合设计：比较抗体变异区域和人源抗体的框架区域的序列，选择合适的人源抗体框架，将小鼠源抗体的变异区域（cdrs）移植到人源抗体框架上。

    基因重组和表达：将设计好的人鼠嵌合抗体基因插入至适当的表达载体（如质粒），并转染至表达宿主细胞（如cho细胞）。经过培养和表达，使基因表达为人鼠嵌合型单克隆抗体。

    纯化和鉴定：使用亲和层析、凝胶过滤等技术，对产生的嵌合型单克隆抗体进行纯化。然后，通过酶联免疫吸附试验（elisa）等方法，对抗体的特异性和活性进行检验和鉴定。

    人鼠嵌合型单克隆抗体的制备过程可能会有一些变化和微调，具体的步骤可能会因实验设计和研究目的而有所不同。