酵母双杂交系统的原理和应用-凯发k8网页登录
酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)是一种常用的蛋白相互作用研究技术,用于检测和分析蛋白质与蛋白质之间的相互作用关系。其原理基于转录激活子的分离,并结合了酵母的遗传特性,具有高灵敏度和较低的假阳性率。
酵母双杂交系统原理:
融合蛋白构建:该方法涉及将感兴趣的两个蛋白分别与两个特殊的酵母蛋白片段(dna结合域和激活域)融合构建为两个融合蛋白。一个融合蛋白包含dna结合域(dbd)和感兴趣蛋白的序列,称为bd融合物。另一个融合蛋白包含激活域(ad)和另一个感兴趣蛋白的序列,称为ad融合物。
目标蛋白相互作用检测:当两个目标蛋白相互作用时,它们会靠近并形成融合蛋白的dbd和ad域之间的功能性复合物。这个复合物能重新组装或恢复从启动子区域中缺失的转录激活子,从而推动一个报告基因的表达。
酵母层面检测:将融合蛋白构建体系转化到酵母细胞中。如果两个融合蛋白相互作用,它们会从感兴趣蛋白的相互作用部位激活转录激活子,进而表达报告基因并形成可观察的表型。
酵母双杂交系统应用:
蛋白与蛋白的相互作用研究:酵母双杂交系统广泛应用于研究蛋白与蛋白之间的相互作用,帮助揭示细胞内的信号传导、代谢途径、基因转录调控等生物过程。
蛋白结构与功能分析:通过酵母双杂交系统,可以确定蛋白质的结构域和功能区域,以及其与其他蛋白质的结合方式。
药物筛选:该技术可用于筛选新的药物靶点,检测潜在药物分子与目标蛋白之间的相互作用。
疾病机制研究:通过对蛋白质相互作用的分析,可以帮助了解疾病的发生机制,寻找与疾病相关的蛋白质间的异常相互作用。
酵母双杂交系统是一种强大而常用的蛋白相互作用研究工具,但需要注意的是,结果需要在酵母细胞中进行验证,并结合其他实验技术进行进一步的确认。
![凯发k8网页登录](/uploads/image/simages/logo.png)
- 扫码登入
- 账户密码登入
- 短信验证登入
须知
首次微信扫码用户步骤:
1.微信扫码。
2.本页面完善手机验证。
-
扫码领资料
扫码领资料
电话:027-87960366
- 文献奖励申请