iptg诱导蛋白表达的原理-凯发k8网页登录
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-07-20 17:28:33
iptg(异丙基-β-d-硫代半乳糖苷)是一种化学试剂,常用于诱导蛋白表达。其原理是通过模拟天然的信号物质,活化在大肠杆菌中存在的lacz操作子。
在大肠杆菌中,lacz操作子是控制乳糖酶(β-galactosidase)基因表达的一段dna序列。在正常情况下,lacz操作子被represor(压制子)分子绑定所致的静默状态,从而抑制乳糖酶基因的表达。
当大肠杆菌生长在无乳糖或低浓度乳糖的培养基中时,lacz操作子上的represor与其结合,形成复合物,阻止rna聚合酶结合和转录乳糖酶基因。
而当添加iptg到培养基中时,iptg会与represor结合,导致represor失去对lacz操作子的结合能力,解离出来。这样,rna聚合酶可以结合到lacz操作子上,启动乳糖酶基因的转录和翻译过程,从而诱导蛋白表达。
iptg是一种人工化合物,与乳糖不同,大肠杆菌无法代谢iptg。因此,添加iptg不会改变细胞的营养状况,仅仅起到诱导蛋白表达的作用。
通过控制iptg的浓度和处理时间,可以实现对蛋白表达的调控。这种诱导方式常用于表达外源蛋白、构建融合蛋白、进行蛋白纯化等实验和应用中。
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