案例展示
服务周期及报价-大肠杆菌表达系统
文章来源:未知 作者:admin 发布时间:2019-01-15 10:01
服务名称 服务项目 服务内容 交付结果 服务周期
普通型大肠杆菌重组蛋白表达服务 质粒构建 包括iptg,阿拉伯糖,热休克,冷休克诱导方式,gst,trx,sumo,bmp,his,ha,flag,myc等融合标签载体的构建。 表达质粒    测序报告 1周
表达菌株筛选 将表达质粒转化到高效的e. coli表达菌株中。sds-page电泳检测,挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
可提供表达菌株:dh5α, top10,  bl21 (de3), bl21 (de3) plys, golden, rosetta(de3), rosettablue(de3),rosetta gami b (de3), c41等宿主。
表达菌株  sds-page图谱 3个工作日
目标蛋白表达及纯化、标签切除 摇瓶培养2-8l重组菌,诱导表达目标蛋白。通过亲和层析,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化目的蛋白;可根据需求切除标签,再纯化获得目标蛋白 大于1mg目的蛋白,纯度最少90%以上 2~3周
包涵体复性 蛋白诱导表达与包涵体纯化
数百种缓冲条件快速筛选最佳复性缓冲,采用稀释复性,透析复性,柱层析复性等多种技术获得纯度大于90%的包涵体。
大于1mg目的蛋白 2~3周
上清保证型大肠杆菌重组蛋白表达服务 质粒构建 采用pcold-sumo载体,sumo标签促溶的同时采用低温诱导方式,促进蛋白的可溶性表达。 表达质粒    测序报告 1周
表达菌株筛选 转化表达质粒于arctic表达菌株,宿主在表达分子伴侣cpn60和共分子伴侣cpn10的同时低温诱导提高上清蛋白的表达量,sds-page电泳检测挑选合适的单克隆菌株用于目的蛋白表达。 表达菌株  sds-page图谱 3个工作日
目标蛋白表达及纯化、标签切除 摇瓶培养2-8 l重组阳性克隆诱导目的蛋白表达。通过亲和层析、离子交换、疏水及凝胶过滤等多种技术纯化目的蛋白,也可根据需求切除标签,再纯化获得目的蛋白。 大于1mg目的蛋白,纯度最少90%以上 3~4周

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