测定蛋白质n端c端的方法-凯发k8网页登录
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-06-20 16:44:31
测定蛋白质的n端和c端可以使用多种方法,以下列出其中常用的几种:
一、n端测定方法:
(1)氨基酸序列分析:通过蛋白质分离、纯化和序列测定技术,可以分析得到该蛋白质的氨基酸序列信息,从而确定其n端序列。
(2)edman 降解法:该方法利用edman试剂(phenylisothiocyanate)将蛋白质n端上的氨基酸与试剂发生缩合反应,进而使n端氨基酸被移除并检测出来。该方法可用于测定多肽或短蛋白,但不能用于蛋白质较长的n端序列测定。
(3)质谱法:利用质谱技术对蛋白质进行离子化和分子量测定,可以得到蛋白质的氨基酸组成,从而推断出蛋白质的n端序列。
二、c端测定方法:
(1)肽片段分析法:将蛋白质水解成小肽段后,通过肽质谱分析可以得到含有c端的肽段,从而推断出蛋白质的c端序列。
(2)抗体检测法:利用具有高度特异性的抗体,可以检测出蛋白质的c端。例如,western blot 和elisa都是基于抗体检测的方法。
(3)质谱法:类似于n端测定,也可以用质谱技术来推断出蛋白质的c端序列。
不同的测定方法各有优缺点,科学家需要根据实验目的和蛋白质本身的特点选择合适的方法。
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